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新芝生物高通量组织研磨仪助力"非洲猪瘟"样品处理

2019年03月03日 热度:542 ℃

八戒:猴哥救我!

悟空:呆子,何事慌张!

八戒:猴哥你没听说吗!非洲猪瘟来了,一个被传染,一窝都遭殃啊!我听说辽宁、黑龙江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已经被扑杀了。

悟空:呆子!那还不离我远点!

问题一、什么是非洲猪瘟?

     非洲猪瘟(African Swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)感染家猪和各种野猪(不传染人)引起一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短,最急性和急性感染死亡率高达100%,且只能依靠实验室监测确诊。   

      2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。

问题二、目前在中国的传染范围?

      自8月初我国首次发现非洲猪瘟以来,截至11月22日,全国有20个省份47个市(区、盟)发生73起家猪疫情、1起野猪疫情,累计扑杀生猪60万头。全国非洲猪瘟疫情呈现多点散发状态,但在各地动物疾控部门的积极行动下,疫情开始趋于平稳,总体防控有效。

问题三、非洲猪瘟检测的样品处理方法介绍

一、非洲猪瘟样品处理

1目的

规范ASFV样品和实验材料的处理程序,保证ASFV相关实验的顺序开展和实验室的生物安全。

2适用范围

适用于疑似ASFV临床样品的实验前的处理

3程序

3.1实验材料

ASF的易感动物,主要为家猪、野猪和蜱,通常采集的样品为家猪、野猪的血液样品、组织样品以及蜱三类。田间采集的样品通常需要经过简单的预处理,才能进行后续的检测、诊断工作。

血清:用于病毒核酸检测、病毒抗原和抗体检测。将采好的猪血的注射器或采血管在室温下倾斜静止2~4h(防止暴晒),或置于37℃温箱内1h,待大部分血清析出后,取出血清,必要时经离心分离血清。(最低建议量5ml)。

抗凝全血:用于病毒核酸检测和病毒抗原检测。

采血前,在真空采血管或注射器内按比例加入抗凝剂。采集血液,轻轻上下颠倒,使血液与抗凝剂充分混匀,防止血液凝固的同时避免溶血。也可以将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内,震荡脱落纤维蛋白。必要时,可加入双抗以抑制血源性或采血过程中可能出现的细菌污染。

当血样用于病毒核酸检测时,一般不用肝素而选用EDTA作为抗凝剂。(最低建议量1mL)。

组织样本:活体采集,采用扁桃体,用于临床健康动物ASF监测。

尸体剖检ASF发病动物或死亡动物经解剖取材,包括:ASFV靶器官的采集:脾脏、淋巴结、肾脏、扁桃体。

其他病变组织脏器的采集:采集具有明显病变的肝脏、肺脏、心脏等组织器官,选取部位在病变和健康组织交界处。

腐败动物尸体的样品采集:剖检取股骨,将附着的肌肉和韧带等全部剔除,采集骨髓。最低建议量5克。

蜱的采集:蜱可进行核酸检测、抗原检测和蜱的形态学鉴定,查找猪圈的墙边、墙缝、木质或瓦质的屋顶,或挖掘猪圈地面均可能找到蜱,也可查看猪表皮,采集蜱。

1-1样品保存条件

注:用于病毒分离和病理学检测的样品禁止-20℃保存。

3.2实验器材和试剂

1)台式高速冷冻离心机、组织研磨仪、水浴锅、计时器、冰箱和移液器等。

2)无菌的剪子、镊子、钢珠、2mLEP管、移液器吸头(10μL,200μL、1000μL)等。

3)其他试剂和耗材主要包括:0.01mol/L PBS(PH7.2)、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。

3.3样品处理程序

3.3.1血清及全血样品处理

取血清或全血样品1mL于灭菌EP管里,保存备用

3.3.2组织样品处理

适用于脾脏等组织样品和蜱的处理。尽可能减少污染,每取一个组织块或蜱,用火焰消毒剪镊等取样器械,组织块应分别放入灭菌容器内并立即密封,做好标记,注意防止组织间相互污染。

3.3.2.1组织样品的处理应在二级生物安全柜中进行,勿使液体溅到生物安全柜中。

3.3.2.2将0.1-0.2g组织块放入2mLEP管中,用剪刀剪成碎块,加1-2mL0.01mol/L PBS(PH7.2),再加入1-2粒灭菌钢珠,密封后,表面消毒备用。剩余样品放回容器内,重新密封,表面消毒后保存-70℃冰箱。

3.3.2.3组织样品的破碎可以利用组织研磨仪在生物安全柜外操作,将样品制成组织悬液。

重磅推荐使用Scientz-48L冷冻高通量组织研磨器

3.4病毒灭活

病毒的灭活处理应在二级生物安全柜中进行,将处理好的血清、全血或者研磨破碎后的组织样品连同EP管放入60℃水浴中,放置30min灭活。

3.5使用后仪器处理

剪刀、镊子等均应放入消毒缸进行消毒,放入铁饭盒内,并装入密封袋内进行高压灭菌处理。装有组织样品保存液的容器和盛有组织块的离心管应密封管口,表面消毒后放入密封袋中高压灭菌。钢珠、吸头等废弃物应用0.8%NaOH浸泡30分钟消毒后,置密封袋内高压灭菌。消毒残液应装入密封容器内高压灭菌处理。

3.6注意事项

操作之前要确认生物安全柜和实验室已进行了彻底的卫生消毒处理,防止样品间交叉感染。

二、非洲猪瘟病毒的核酸检测可用实时荧光PCR配套相应实际进行,具体操作步骤以仪器生产公司指南为准。

问题四、病毒杀灭和防控方式

非洲猪瘟病毒虽然在环境中比较稳定,但在猪肉烹煮处理过程中较易失活,70℃-75℃加热30分钟以上,病毒就会被杀灭,也就是说我们日常烹饪过程中只要把猪肉熟透(包括最中间部位温度至少达到70℃以上),即使有病毒也会很快失去感染力并丧失活性。

新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器介绍

新芝生物推出的Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器具备以下特征:

1.应用场景多样。可以对不同组织进行干磨、湿磨、混合以及均质化处理。

2.实验效率高。能提高提取大通量样品中核酸的效率和质量。

3.实验过程安全。研磨过程采用封闭式一次性离心管,有效地避免了样品交叉污染。

4.仪器稳定性好。对同一组织样品可设定相同的研磨程序,从而获得相同的研磨效率,提高了实验的可重复性。

5.研磨效果好。产品采用高效研磨球进行研磨,相较于传统研磨方式对样品的研磨更为均匀、充分。

目前,新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器已助力沈阳、大连、朝阳、本溪、鞍山、锦州、葫芦岛等多地动物疾控中心用于非洲猪瘟检测实验的样品前处理。

Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器高效、稳定、安全的仪器特性很好地解决了检测过程中检测样品数量多、实验一致性难以控制等问题,得到了广大用户的一致好评。

产品用途

1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎; 2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌  肉、骨骼等样品的研磨破碎;3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎;4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎;5.适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎;6.适用于塑料、聚合物包括PE、PS、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。

主要技术参数

1.时间设定:1(秒)-9999(秒)

2.频率设定:10—70Hz,即振荡300—2100次/min 

3.额定功率:180W

4.夹具行程:34mm(垂直)

5.温度设置 : -20℃或者-30℃

6.电磁锁控制开门

7.样品容量:随机标配:铝合金适配器5ml 12孔,2ml 48孔

     可选配:铝合金适配器2ml24孔

8.电源需求:220V单相交流,<2.5A

新芝生物公司简介

依托强大的科研技术实力,公司在超声波、温湿度、高低压、超低温等技术层面积累了丰厚的经验,并先后研究开发包括生物样品前处理仪器、分子生物学仪器、实验室洁净设备、冷冻干燥设备、工业防垢除垢设备、环保除藻防控设备在内的多款产品。公司始终坚持业界前沿的技术研究和应用开发,致力于为科研、教育、环保、医疗、制药、石化、农林、材料等领域客户提供先进的产品设备和行业解决方案。

公司目前拥有宁波、杭州两地四大研发中心,拥有高水平研发人员数十人,专利60余项。公司曾多次承担国家科技部、发改委、卫生部重大科研项目,是国家发改委高技术产业化示范工程中心、科学仪器产业化基地、宁波企业工程(技术)中心。公司研制的高压气体基因枪一举打破国外技术垄断,填补国内相关领域空白,荣获浙江省科技进步二等奖。

公司高度重视品牌培育和市场开拓,为更好地服务客户,公司在全国各地建有30余个办事处,办事处均配备销售工程师和售后工程师,可随时满足客户需求。全球超过15,000家实验室在使用新芝生物的产品,各类仪器设备市场保有量超过100,000台套,产品远销美、英、法、俄、日、韩等36个国家,公司年度销售收入突破1亿元人民币,已经成为国内乃至全球知名的生物样品制处理设备研制专家。

新芝生物30年风雨兼程,以新致心,将继续致力于为各行业客户提供优质的产品和贴心的服务!

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